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ELISA和流式有啥不同,一個例子講清楚

更新時間:2025-10-17點擊次數:157

細胞因子是免疫細胞或非免疫細胞合成和分泌的具有生物活性的多肽或蛋白質。

檢測細胞因子的方法就是ELISA。這個實驗的具體原理咱們就不說了哈。

ELISA測的細胞因子是從細胞內分泌到胞外的游離細胞因子,它可以明確定量這群細胞分泌細胞因子的能力,同時也可以證明這群細胞除了能合成出這種細胞因子,還能把它分泌出胞外產生作用。

微信圖片_20251017090947.jpg

圖:sanquin以上是ELISA能做的,但它做不到的是什么呢?

它無法區分出樣本細胞中的哪一種或哪幾種細胞、細胞亞群能合成細胞因子,因為細胞因子都分泌出來到外面了嘛。

而另一種實驗方法則互補了這個分析需求——流式胞內染色。

其原理是利用熒光素偶聯的抗細胞因子的單抗,如果細胞能合成該細胞因子,那么抗體與細胞因子結合時,細胞就帶上熒光素,并在相應激光激發后產生熒光信號。

微信圖片_20251017091128.jpg

圖:sanquin它和流式檢測細胞表面抗原很像。但區別在于活細胞是排斥這些熒光素偶聯抗體的,直接標記做不到。

因此只能先固定細胞,讓它保持一定的形狀,接著破壞細胞膜——本質上不是破壞整個膜,而是在膜上打孔。這樣,抗體就能進入胞內和細胞因子結合了。

所以,流式胞內染色測細胞因子,能明確知道某個細胞因子來自哪些細胞,并且可以算出這些細胞在整個樣本中的比例。兩種方法各有千秋,不能說哪種方法絕對更好。流式胞內染色更像是一種定性分析,

先明確細胞是否能產生細胞因子,后續再根據需要進一步分選或定量分析而ELISA就是妥妥的定量分析工具,可以作為胞內染色分析之后的下一步分析。

微信圖片_20251017091315.jpg


圖:Linkedln例如,要敲定某個細胞是否能合成和分泌特定的細胞因子時,可以用這兩種方法配合分析。如果兩種方法都能得到陽性結果,就可以明確結論。

最后,一句話總結一下今天的內容:測細胞因子,流式胞內染色能知道它來自什么細胞,這些細胞的比例如何;ELISA能給出細胞因子的量。

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