一、大鼠維生素B3(VB3)elisa試劑盒廠家推薦
適用范圍：僅用于科研實(shí)驗(yàn)，禁用于臨床
標(biāo)本要求：血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
保質(zhì)期：2~8℃，*溫度6攝氏度，有效期6個(gè)月。
檢測(cè)方法：酶聯(lián)免疫吸附法
反應(yīng)時(shí)間：1-5h所需
樣本體積：50-100ul
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm
供應(yīng)貨期；大鼠維生素B3(VB3)elisa試劑盒直銷價(jià)格現(xiàn)貨供應(yīng)
友情提示：僅供科研實(shí)驗(yàn)，不得用于其他用途；使用前仔細(xì)閱讀說明書

二．【*優(yōu)勢(shì)】

1、產(chǎn)品種類齊全、質(zhì)量可靠、靈敏度高、效果穩(wěn)定、易保存、操作簡(jiǎn)便

2、免費(fèi)提供產(chǎn)品報(bào)價(jià)、實(shí)驗(yàn)原理、產(chǎn)品用途及中英文說明書

3、發(fā)貨及時(shí)（上海本地客戶有專門人員送貨上門及取標(biāo)本）

4、免費(fèi)提供ELISA代測(cè)服務(wù),蓮霄擁有自己的實(shí)驗(yàn)室。

三．需要的器材

儀器：酶標(biāo)儀、打印機(jī)、均質(zhì)器 、氮?dú)獯蹈裳b置、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平（感量0.01g）

微量移液器：?jiǎn)蔚?0µl-200µl，100µl-1000µl、多道300µl

四．操作流程

將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出，置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時(shí)可能會(huì)有結(jié)晶需恢復(fù)到室溫以充分溶解，每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架，將不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。

實(shí)驗(yàn)開始前，用去離子水將20×濃縮洗滌液按20倍稀釋成工作洗滌液。

編    號(hào)：將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。

加樣反應(yīng)：加標(biāo)準(zhǔn)品或樣本50µl/孔到各自的微孔中，然后加酶標(biāo)記物50µl/孔，再加入50µl/孔的抗體工作液，用蓋板膜封板，輕輕振蕩5秒混勻，25℃反應(yīng)30分鐘。

洗    滌：小心揭開蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，用工作洗滌液250µl/孔充分洗滌5次，每次間隔30秒，用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破）。

顯    色：每孔加入底物液A 50µl，再加底物液B 50µl，輕輕振蕩5秒混勻，25℃避光顯色15分鐘。

終    止：每孔加入終止液50µl，輕輕振蕩混勻，終止反應(yīng)。

測(cè)吸光值：用酶標(biāo)儀于450nm處測(cè)定每孔吸光度值（建議用雙波長(zhǎng)450/630nm）。測(cè)定應(yīng)在終止反應(yīng)后10分鐘內(nèi)完成。

五． 結(jié)果分析

百分吸光率的計(jì)算

標(biāo)準(zhǔn)液或樣本的百分吸光率等于標(biāo)準(zhǔn)液或樣本的百分吸光度值的平均值（雙孔）除以*個(gè)標(biāo)準(zhǔn)液（0ppb）的吸光度值，再乘以100%，即

A—標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值

A0—0ppb標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值

標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制與計(jì)算

以標(biāo)準(zhǔn)液百分吸光率為縱坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)液濃度（ppb）的對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)液的半對(duì)數(shù)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對(duì)應(yīng)的濃度，乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中待測(cè)物的實(shí)際濃度。

若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進(jìn)行計(jì)算，更便于大量樣本的準(zhǔn)確、ELISA分析。（索取）

客戶常見問題解答：

• 我在移液的時(shí)候是否要按照一定的順序？

◆ 根據(jù)說明書中的順序進(jìn)行移液操作。
◆ 高靈敏度檢測(cè)利用了放大系統(tǒng)。在底物孵育完成之后，按照加底物的順序依次加入放大試劑。
◆ 底物加完之后，輕拍酶標(biāo)板使其充分混合。

• 底物有可能被污染嗎？

◆ 是的。如果測(cè)定時(shí)使用的是堿性磷酸酶或者辣根過氧化物酶標(biāo)記的結(jié)合物，在測(cè)定時(shí)要注意避免污染。污染可能會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)生超過酶標(biāo)儀范圍的值。避免與金屬或氧化試劑接觸。使用新容器。

• 底物是否需要在黑暗環(huán)境中進(jìn)行孵育？

◆ 不需要。不過在孵育過程中應(yīng)避免陽(yáng)光直射。

溫度怎樣影響結(jié)果？
◆ 堿性磷酸酶或者辣根過氧化物酶都是光敏感型酶。光密度單位或者相對(duì)光單位都會(huì)隨著溫度的改變而變化。
◆ 避免在環(huán)境條件變化劇烈的地方孵育。（比如通風(fēng)口，窗口這些溫度和光照都劇烈變化的地方） 為了保證酶結(jié)合物和底物反應(yīng)*：
◆ 對(duì)于比色法測(cè)定：
將同體積的結(jié)合物和底物溶液充分混合（對(duì)于高靈敏度的試劑盒，在加入同體積的結(jié)合物和底物一分鐘之后，再加入等體積的擴(kuò)增劑）。顏色若不是立即顯現(xiàn)，則檢查所加成分是否在正確的貯藏溫度下保存，是否被污染，是否在有效期內(nèi)。

• 如您也有ELISA實(shí)驗(yàn)方面的問題，也可以聯(lián)系我們一起探討，我們一起學(xué)習(xí)，共同成長(zhǎng)！

• 友情提醒：凡購(gòu)買我司ELISA試劑盒，均可提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，上海蓮霄生物科技有限公司專注酶聯(lián)免疫，專注ELISA，期待您的來電！